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Qiagen（凯杰）试剂盒Ni-NTA 琼脂糖:北京总代德国Qiagen24孔真空驱动装置 |
更新时间：2026-08-24 02:40:40 |
Qiagen（凯杰）试剂盒Ni-NTA 琼脂糖访问量：459 型号：30210 品牌：Qiagen（凯杰） 中文名称：Ni-NTA 琼脂糖 (25 ml) 品 牌：QIAGEN 货 号：30210 利用重力流层析纯化His-tagged蛋白 一步纯化就可从细胞裂解液中得到纯度大于95%的蛋白 高亲和力和高结合能力 可以选择在天然或变性条件下纯化蛋白 预先加载的即用型基质适合任何规模的蛋白纯化 提供自动纯化和检测的方法 Ni-NTA Agarose是亲合层析用基质，用于纯化带有His标签的重组蛋白。His标签上的组氨酸残基能高特异性的结合到固定的镍离子上。细胞裂解上清液上样到纯化基质上，His-tagged蛋白结合，其他蛋白则流过基质。洗涤后，His-tagged蛋白可在天然或变性条件下洗脱。 特点 参数 应用 Proteomics 磁珠大小 45–165 μm 结合能力 Up to 50 mg/ml 快速蛋白液相色谱 Yes 重力流或离心柱 Gravity flow 处理 Manual/Automated 规格 Large scale 特性 Batch and column purification 起始材料 Cell lysate 支持/基质 Sepharose CL-6B 标签 6xHis tag 产量 100 μg – 100 mg 性能 Ni-NTA Agarose中的Ni-NTA与Sepharose CL-6B support偶联，具有强结合能力，非特异性结合少（参见One-step purification under native conditions）。这种材料对于多数的生产规模和柱纯化具有极佳的可操作性。Ni-NTA Agarose可单独订购，也包含在QIAexpress Kits中。QIAexpress Kits是适用于大肠杆菌His-tagged蛋白高效表达和纯化的完整试剂盒。 原理 QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于获得专利的Ni-NTA（氨基三乙酸镍）树脂，对含有6个或以上组氨酸残基（连续或交替）亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下，从所有表达体系中一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点，与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子脱落，因此具有更强的结合能力，蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术可用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌等各种表达体系中纯化His-tagged蛋白。 操作流程 His-tagged蛋白的纯化包括四个步骤：裂解、结合、洗涤和洗脱（参见Protein purification with the Ni-NTA protein purification system）。使用QIAexpress 技术纯化重组蛋白无需依赖于蛋白的三维结构或6xHis标签。因此可实现在天然或变性条件下，从稀释溶液或细胞裂解液中一步纯化蛋白。可使用强变性剂和洗涤剂高效溶解和纯化受体、膜蛋白和形成包涵体的蛋白。洗涤缓冲液中可包含有能高效去除非特异性结合产物的试剂（见表）。在温和条件下加入100–250 mM咪唑作为竞争性洗脱试剂或降低pH值，可洗脱得到纯化蛋白。 可与His/Ni-NTA共同使用的试剂 变性剂 洗涤剂 还原剂 其他 盐 长期储存 6 M Gu·HCl 2% Triton X-100 20 mM β-ME 50%甘油 4 M MgCl2 至多30%的乙醇 8 M尿素 2% Tween 20 10 mM DTT 20%乙醇 5 mM CaCl2 或100 mM NaOH 1% CHAPS 20 mM TCEP 20 mM咪唑 2 M NaCl 应用 Ni-NTA基质可靠的一步纯化得到His-tagged蛋白，适用于多种应用，包括： 结构和功能研究 蛋白结晶，用于三维结构检测 蛋白与蛋白，蛋白与DNA相互作用研究 抗体制备 纯化放大的生产规模北京总代德国Qiagen24孔真空驱动装置德国Qiagen试剂盒大分子量DNA提取试剂盒 淋巴细胞分离试剂(LSM)现货促销乳酸乳球菌表达系统 核糖核酸酶A 脱氧核糖核酸酶量产防水测试器 OBET2.5 韩国DMC |
北京总代德国Qiagen24孔真空驱动装置型号：19413 品牌：Qiagen（凯杰） 英文名：QIAvac 24 Plus 中文名：24孔真空驱动装置 品 牌：Qiagen 货 号：19413 真空驱动处理多至24个离心柱 减少样品操作，加快处理 平行样品处理 QIAvac 24 Plus真空歧管用于同时真空处理多个QIAGEN离心柱。 原理 真空驱动的液体处理方法可加速样本操作，无需在离心机中安装并拆除离心柱的繁琐过程，也无需在结合和洗涤过程中去除流出液，因此减少了手工制备时间（参见Vacuum-driven liquid processing on vacuum manifolds）。在从敏感样本中纯化核酸时，防止交叉污染尤其重要。将QIAGEN离心柱插入一次性的VacConnectors中，防止直接与离心柱接触。使用VacValves可确保黏稠性样本（如血液）接触的真空压力稳定。QIAvac 24 Plus和QIAvac Connecting System是方便处理多种QIAGEN试剂盒的理想组合。 操作流程 将1–24个离心柱插入歧管中，加入样本或缓冲液，打开真空泵。样本和缓冲液在压力下通过离心柱，便于大体积样本上样，不必弃去流出液。真空驱动的液体处理方法比离心方法的速度快，并且产量高、可重复（参见High, reproducible yields of genomic DNA）。 配合QIAvac Connecting System，QIAvac 24 Plus可作为流通系统（参见An integrated system for various applications）。可能含有有害物质的流出液被收集在单独的废物瓶里。 应用 使用QIAvac 24 Plus真空底座可快速、高效的真空处理QIAGEN离心柱，可用于实验室研究。真空驱动的液体处理方法可代替离心操作，减少样本制备的手工操作时 |
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