货号：74104 总RNA小提试剂盒 (50)
英文名称：RNeasy Mini Kit (50)
中文名称：总RNA小提试剂盒 (50)
品 牌：Qiagen
货 号：74104
从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA
数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
即用型RNA在各种下游应用中表现良好
少量起始样本，RNA产量稳定
无需酚/ 氯仿抽提，无需氯化铯梯度离心，无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
RNeasy Mini Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA，硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。可在QIAcube全自动核酸纯化仪上应用RNeasy Mini Kit实现RNA纯化自动化。处理更小或更大的样本，可使用RNeasy Micro Kit（离心柱结合能力为45 μg RNA）、RNeasy Midi Kit（离心柱结合能力为1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（离心柱结合能力为6 mg RNA）。
特点 参数
应用 PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积 30–100 μl
规格 Spin column
主要样本类型 Tissue, cells
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Total RNA
样本量 0.5–30 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 20 minutes
产量 Varies
性能
RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本，或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA（参见RT-PCR of RNA from as few as 100 cells和High-quality RNA from a variety of samples）。
RNeasy Mini Kit纯化得到的总RNA产量样本来源 起始材料 平均产量（μg）
动物细胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴细胞（未受激）
1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106
12
15
35
0.5
小鼠组织
肝
肺
脾
10 mg
10 mg
10 mg
40
10
35
真菌细胞
S. cerevisiae
1 x 107
25
原理
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA，并且DNA残留水平达到最低。
操作流程
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见RNeasy Mini spin column）。RNA结合到膜上（最多可结合100 μg），污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用，可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理，去除DNA残留。之后可在30–100 μl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA（参见RNeasy Mini procedure）。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
应用
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1（10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），适用于多种下游应用，包括：
Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
终点式RT-PCR
定量Real-Time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA筛选 |
